Taqman探针法原理（定量PCR）

Taqman探针法荧光定量PCR技术原理

Taqman探针法检测SNP位点技术原理

通过TaqMan探针的方法进行基因分型，对于单个位点多个样本（100个样品以上）的检测的费用较低，能快速自动判定SNP位点信息。

仅适合已知的SNP位点的基因分型。

技术特点：

★ 适合位点数量少，样本通量高的检测（每个位点需要合成两条探针，探针合成费用高）

★ 应用 ABI7500定量PCR仪进行定量检测

★ 操作简便，只需一步 PCR 反应，无须进行纯化和预处理，直接上机检测

★ 结果清晰，软件分析结果界面友好，标出了每个样本的基因型及荧光强度，非常直观

★ 可采用ABI合成的探针或国产探针

服务流程：

★抽提DNA

★引物/TaqMan探针设计与合成

★定量PCR

★测序

在所有SNP的检测方法中，通过Sanger法对欲检测片段进行直接扩增、测序是最为准确的方法，是SNP分析的金标准。通常情况下，纯合型SNP位点的测序峰为单一峰型，而杂合型SNP位点的测序峰为套峰，因而很容易将其区分开来（如下图），通过直接测序方法进行SNP检测的检出率接近100%。

通过直接测序的方法来确定位点的基因型，这种方法准确性最高，但费用大，对于准确性要求高或样品量少（几个或几十个）的项目，这种分型技术很适合。

已知或未知的SNP位点均可使用这种方法。